Nanolocalización de proteínas de señalización en el espermatozoide de mamífero:

Inmunofluorescencia de la proteína GTPasa CDC42 y de su regulador RhoGDI en el espermatozoide de ratón. En la parte izquierda de la figura se observan imágenes de la proteína RhoGDI (a) en color magenta, de CDC42 (b) en color verde y la sobreposición de la señal de ambas proteínas (c). Los recuadros en blanco representan una sección de interés en el flagelo del espermatozoide, la cual se amplificó y se visualiza en las imágenes del panel central (XY). En éstas se utilizó una escala de color para ilustrar la profundidad de la imagen en el eje Z eje Z, en donde se ilustra un arreglo cuadrilateral longitudinal de ambas proteínas. En las imágenes de la derecha se observa la sección transversal en el eje YZ de las imágenes de la columna central, con el fin de demostrar la posición axial de las proteínas de interés. En la imagen inferior derecha es posible detectar una zona de color blanco (flecha) que indica que estas proteínas probablemente se localizan en la misma región (colocalización).

¿Por qué es importante estudiar estas proteínas?

Nuestro grupo de investigación demostró que la proteína de señalización CDC42 participa en la regulación de la función espermática, y que su localización a nivel nanoscópico coincide con la de otras proteínas indispensables para la fecundación. Actualmente, estamos interesados en investigar qué proteínas podrían estar regulando la función de CDC42. Uno de los candidatos más relevantes es la proteína RhoGDI, la cual participa en el proceso de relocalización espacial de las proteínas de señalización conocidas como las pequeñas GTPasas (como CDC42), con el fin de que estas se situen en el sitio específico donde son requeridas.

Las imágenes fueron adquiridas con un microscopio Zeiss LSM 900 usando el objetivo 60x N.A. 1.4 de inmersión en aceite, la captura de las imagenes se realizó con la función superesolución Airyscan y procesadas mediante deconvolución Richardson-Lucy usando el software Zen Blue 3.8.  La versión final de las imágenes fue realizada en ImageJ.

Autor: J. Arturo Matamoros Volante. Datos no publicados, 2023